含琼脂培养基不凝固

2020-03-11 14:34:51  常见问题

答:含琼脂培养基不能凝固,主要有一下几方面的原因:

1、在制备过程中过度受热,导致琼脂结构造成破坏,冷却后不能形成凝胶。其次过度加热,会改变培养基的pH值,过低或过高的pH值都会影响琼脂的凝胶强度,从而导致倾注的平皿不凝固。

2、培养基在灭菌后,琼脂未充分混匀,就倾注平皿,这会出现前期倾注的平皿不能凝固,后期倾注的平皿凝胶强度特别高。或培养基未倾注完,在灭菌容器的底部已经出现凝固的琼脂块。因此培养基在倾注前或灭菌后应充分摇匀,使琼脂混匀。

3、培养基中的琼脂未完全溶解,在商业培养基中的标签的用法上标注,加热至完全溶解后再高压灭菌,该操作主要目的是保证培养基中的琼脂完全溶解。另外一些无需高压灭菌培养基,一定要多次煮沸,保证琼脂完全溶解。

4、称量不正确,低于配制量,会导致琼脂的量降低,造成不凝固现象。

5、配制过程中培养基装量过多,使培养基过度受热,造成pH值降低,培养基酸解,使培养基中的琼脂分子结构造成破坏。因此培养基的装量一般不超过容器体积的70%