SCDLP液体培养基是如何进行制备的?

2022-01-12 14:10:28  微生物基本知识

SCDLP液体培养基是如何进行制备的?

1.准备溶液

在容器中加入一部分所需量的水,按照培养基的配方称取各种原料,依次加入使其溶解,后补足所需的水。蛋白胨、肉酱等物质需要加热溶解,加热时蒸发的水分在所有原料溶解后再加水。

准备固体培养基时,先将准备好的SCDLP液体培养基煮沸,然后加入称好的琼脂,继续加热至完全融化。继续搅拌,避免烧坏琼脂糊底部。

2.调节酸碱度

用pH试纸(或pH电位计或氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值。如果不符合要求,可以用10%盐酸或10%氢氧化钠调节,直到配方要求的酸碱度调节完

3.过滤

趁热用滤纸、纱布或棉花过滤准备好的培养基。用纱布过滤时,好折叠成六层。用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱柱状,铺在漏斗上过滤。

4.包装

过滤后的SCDLP液体培养基应分开包装。如果要制作倾斜培养基,需要将培养基分成试管。如果要制作平板培养基或液体或半固体培养基,培养基应装在锥形瓶中。

包装时,一只手松开弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几个试管或锥形瓶,依次拿起培养基。包装时注意不要使培养基粘附在管口或瓶口,以免浸泡棉条造成杂菌污染。

装入试管的培养基量取决于试管和锥形瓶的大小和需要。一般制作斜面培养基时,每根15150 mm试管装3 ~ 4 ml左右(1/4 ~ 1/3管高),如果制作深层培养基,每根20220 mm试管装12 ~ 15 ml左右。每个锥形瓶中填充的介质通常是其体积的一半。

5.添加棉塞

分装后,需要用棉塞塞住管口或瓶口。棉塞的主要用途是过滤空气,避免污染。棉塞应使用普通的新鲜干棉,不能使用脱脂棉,以免脱脂棉吸水而不使用棉塞。

制作棉塞时,根据棉塞的大小将棉花铺成合适的厚度,抓一片手掌,铺在左手拇指和食指形成的圆孔中,右手食指插入棉塞中间,同时左手食指和拇指稍握,就会形成一个长条状的棉塞。

棉塞制作完成后,应迅速插入管口或瓶口,棉塞应紧贴内壁,不留缝隙,防止空气中的微生物沿褶皱侵入。棉塞不应太紧或太松。卫生棉条堵塞后,便携式卫生棉条、管子和瓶子不要掉落是合适的。棉塞的三分之二应该在管子或瓶子里,上端露出一点棉花便于拔出。试管和塞有棉塞的圆锥形瓶子应盖上厚纸,用绳子捆绑消毒。

6.制作斜面培养基和平板培养基。

培养基灭菌后,如斜面培养基和平板培养基,应在培养基固化前进行。